F 10 мг/мл  400 мкл р-ра E  600 мкл

G 5 мг/мл  500 мкл р-ра F  500 мкл
H 0мг/мл  0  1000 мкл

Инкубация в течение 10 минут при 90с
Пробирки охлаждаются, просмотр на Feyond A 300

Ооооо электролитыыыы

1.Листья промыть проточной водой, затем в дистилляте. Хорошо просушить фильтровалкой.
2.Нарезать листья на круги. Должно получиться 0.2г при небольшом разбросе. В 3 повторах.
3.Нарезанные листья промываются в деионизированной воде, просушить на фильтровалке.
4.Помещаются в стеклянные пробирки с 10 мл деионизированной воды, закрываются пробкой.
5.Штатив с пробирками помещается на шейкер. Speed 120. Time 60 min.
6.На ночь в холодильник.
7.След день 1 ч шейкер Speed 120. Time 60 min.
8. Дождаться комнатной температуры.
9.Замеры на кондуктометре.
10.Образцы поместить на водяную баню (100с) 1ч. Снять пробки, плотно накрыть фольгой.
11.После остывания замеры на кондуктометре.

Засуха RWC

1.Подготовить пластиковые пробирки с 10 мл дистиллята.
2.Навесить нарезанные листья по 0.2г (0.1г при малом количестве)
3. Убрать в холодильник на ночь.
4.На след день. Достать из холодильника
5. Просушить на фильтровалке
6.Поместить в бюксы и в сушильный шкаф на 100с (2 часа)
7. Доставать по одной бюксе и взвешивать (Быстро набирают влагу из воздуха)

СОД (updated)

Сток растворы:

1.NBT(НСТ) нитросиний тетразолий
Светочувствителен. Долго растворяется. Жёлтого цвета.
х1 0.02 г в 200мкл спирта и 1800 мкл h2o.
х2 0.04 г в 200 мкл спирта и 1800 мкл h2o.
Хранить в холодильнике без доступа к свету. (2 недели максимум)

2. Рибофлавин (B2 витамин). Оранжевый. Светочувствителен. Растворяется долго. Растворять только в воде.
0.01 г в 2мл H2O.

На 350 мл.
1. 1М Tris - 14 мл
2. L метионин - 0.528 г
3. Х1 NBT - 1.547 мл из стока
4. Рибофлавин - 80.5 мкл из стока
5. Тритон х100 - 87.5 мкл.
6. Довести до 350 мл.

На 100мл
1. ТРИС-Hcl 4 мл 1М (7.8 pH)
2. L-метионин 0.15г + 5мл H2O
3. Нитросиний тетразолий 50мкл
4. Тритон 25 мкл чистого
5. Рибофлавин 50 мкл
6. Довести водой до 100 мл

На 60 мл
1. 1М Tris - 2.4 мл
2. L метионин - 0.09г
3. Х1 NBT - 265 мкл из стока
4. Рибофлавин - 13.8 мкл из стока
5. Тритон х100 - 15 мкл
6. Довести до 60 мл

На 30 мл
1. 1М Tris - 1.2 мл
2. L метионин - 0.045 г
3. Х1 NBT - 132 мкл из стока
4. Рибофлавин - 6.9 мкл из стока
5. Тритон х100 - 7.5 мкл
6. Довести до 30 мл

Анализ
1. К 40 мкл экстракта белка добавить 1960 мкл смеси реагентов.
Контроль 40 мкл H2O + 1960 мкл смеси.

30 минут под лампу, каждые 5 минут проверять. Контрольные должны потемнеть довольно быстро. Образцы могут и не потемнеть вовсе если активность СОД высокая.
Можно использовать меньше экстракта белкового.(?)
Реакция останавливается помещением в темноту. Если снова засветить - краситель развалится.

Измерять при 560 нм.